Bewährte Verfahren für die Validierung von Desinfektionsmitteln in Reinräumen
Desinfektionsmittel, die in Reinräumen in der Pharma-, Biotechnologie- und Medizinprodukteindustrie verwendet werden, müssen für den vorgesehenen Verwendungszweck validiert sein. Dies ist eine behördliche Vorgabe, um sicherzustellen, dass das geeignete Desinfektionsmittel verwendet wird und die mikrobielle Kontrolle in der Umgebung aufrechterhalten wird. Ein Bestandteil der Validierung ist die Wirksamkeitsprüfung von Desinfektionsmitteln, wobei die antimikrobielle Wirksamkeit des Desinfektionsmittels im Labor geprüft wird. Der folgende technische Tipp enthält Empfehlungen für bewährte Verfahren zur Prüfung der Wirksamkeit von Desinfektionsmitteln im Labor.
2019-02-08
Loading component...
Loading component...
Loading component...
Loading component...
Loading component...
Wichtige Erkenntnisse:
Die Wirksamkeitsprüfung von Desinfektionsmitteln muss die tatsächlichen Anwendungsbedingungen widerspiegeln – einschließlich Verdünnung, Einwirkzeit und Temperatur – und sollte standortspezifische Umweltisolate einbeziehen, um die Relevanz und die Einhaltung der Vorschriften sicherzustellen.
Die für die Prüfung verwendeten Teststreifen müssen repräsentativ für die Reinraumoberflächen sein, frei von Rost oder Lochfraß sein und mit den Sterilisationsmethoden kompatibel sein. Ein unsachgemäßer Zustand oder eine unsachgemäße Verarbeitung der Teststreifen kann die Gültigkeit der Prüfung beeinträchtigen.
Mikrobielle Suspensionen müssen frisch zubereitet und entsprechend konzentriert werden, wobei für Pilze eine besondere Handhabung (z. B. Filtration von Konidiensuspensionen) erforderlich ist, um eine genaue Bewertung der log₁₀-Reduktion gemäß USP <1072>-Standard zu gewährleisten.
Die Validierung der Neutralisation ist von entscheidender Bedeutung, um sicherzustellen, dass die Desinfektionsaktivität bei der definierten Nasskontaktzeit gestoppt wird. Dabei kommen die in USP <1227>, USP <61> und EN 13697 beschriebenen Methoden zum Einsatz, wobei geeignete Neutralisatoren auf der Grundlage der Wirkstoffe ausgewählt werden.
Die Wiederherstellung durch Eintauchen ist die bevorzugte Methode zur mikrobiellen Wiederherstellung von Teststreifen, und die Wiederherstellungsmethode muss für die jeweilige Oberfläche und den jeweiligen Organismus validiert werden, um genaue Wirksamkeitsergebnisse zu gewährleisten.
Desinfektionsmittel, die in Reinräumen in der Pharma-, Biotechnologie- und Medizinprodukteindustrie verwendet werden, müssen für den vorgesehenen Verwendungszweck validiert sein. Dies ist eine behördliche Vorgabe, um sicherzustellen, dass das geeignete Desinfektionsmittel verwendet wird und die mikrobielle Kontrolle in der Umgebung aufrechterhalten wird. Ein Bestandteil der Validierung ist die Wirksamkeitsprüfung von Desinfektionsmitteln, wobei die antimikrobielle Wirksamkeit des Desinfektionsmittels im Labor geprüft wird. Der folgende technische Tipp enthält Empfehlungen für bewährte Verfahren zur Prüfung der Wirksamkeit von Desinfektionsmitteln im Labor.
Allgemeine Erwartungen
Die verwendete Verdünnung, Einwirkzeit und Einwirkungstemperatur des in der Studie bewerteten Desinfektionsmittels sollten den tatsächlichen, vorgesehenen Anwendungsbedingungen des Desinfektionsmittels im klassifizierten Bereich entsprechen.
Aus regulatorischer Sicht ist es wichtig, Standortisolate aus der Umweltüberwachung (Environmental Monitoring, EM) zu bewerten. Wählen Sie Isolate für die Wirksamkeitsprüfung der Desinfektionsmittel aus, nachdem die Ausgangsbedingungen der Umweltüberwachung festgelegt wurden.
Diese sollten auf Folgendem basieren:
Häufigkeit des Auftretens
Erwartete und/oder nachgewiesene Schwierigkeiten bei der Desinfektion (z. B. Bacillus cereus)
Auftreten in hoher Anzahl, bei Wiederherstellung
Teststreifen
Arbeiten Sie mit Herstellern von Reinraumoberflächen zusammen, um repräsentative Teststreifen für Oberflächen in klassifizierten Bereichen zu erhalten. Oberflächen mit genau definierten Spezifikationen (z. B. 304 SS, 316L SS) können über allgemeine Bezugsquellen bezogen werden.
Der Zustand der Teststreifen kann die Wirksamkeitsprüfung der Desinfektionsmittel erheblich beeinflussen. Teststreifen sollten:
Keinen Rost oder Lochfraß aufweisen, der nicht repräsentativ für die Oberflächen der klassifizierten Bereiche ist
Flach sein
Sich nicht auf einem Trägermaterial befinden, das saugfähig ist, fasert oder fusselt
Prüfen Sie Teststreifen des Oberflächenmaterials auf Hitzebeständigkeit, wenn Sie die Verarbeitung in einem Feuchtigkeitssterilisator vornehmen. Es kann auch eine chemische Dekontamination mit einem Sporizid wie Spor-Klenz® RTU Sterilisationsmittel verwendet werden. Eine unsachgemäße Handhabung der Teststreifen kann die Testergebnisse beeinträchtigen.
Mikroorganismen
Erhöhen Sie die Wahrscheinlichkeit lebensfähiger vegetativer Bakterienkulturen durch:
Inkubation von Kulturen für 18–24 Stunden (für die meisten vegetativen Bakterien)
Bei Lagerung bei Raumtemperatur sind die Suspensionen innerhalb von 2 Stunden zu verwenden, bei Lagerung im Kühlschrank innerhalb von 24 Stunden.
Verwenden Sie eine Spektralphotometerkurve, um die Konzentration koloniebildender Einheiten (Colony Forming Unit, CFU) in Suspensionen einzuschätzen, anstatt die Ergebnisse der Populationsbestimmung abzuwarten.
Stellen Sie sicher, dass die Konzentration der Inokulum-Suspension ausreicht, um die erforderliche log10-Reduktion nachzuweisen. Berücksichtigen Sie die Nachweisgrenze der Wiederherstellungsmethode und den potenziellen Verlust lebensfähiger Zellen aufgrund der Sterblichkeit durch Austrocknung. Vorläufige Trocknungsstudien problematischer Arten wie Pseudomonas aeruginosa und Candida albicans können die Notwendigkeit wiederholter Tests aufgrund geringer Wiederherstellungsraten vermeiden.
Wenn mit einer Pilzsporen-(Konidien-)Suspension gearbeitet wird, ist eine Filtration der Sporensuspension zur Entfernung von Myzel-Fragmenten erforderlich. Die Filtration ist durch die Verwendung verschiedener Filtermaterialien, wie steriler Glaswolle oder einem Frittenfilter, möglich. Das Vorhandensein von Myzel-Fragmenten oder Hyphen kann die Pilzsporen vor dem Kontakt mit dem Desinfektionsmittel oder Sporizid schützen.
Stellen Sie sicher, dass zur Bewertung der Wirksamkeit von Desinfektionsmitteln geeignete Akzeptanzkriterien für die Log10-Reduktion verwendet werden. USP <1072> Desinfektionsmittel und Antiseptika fordert:
3 log10 Reduktion vegetativer Bakterien
2 log10 Reduktion der Bakteriensporen
Dies sind die entsprechenden Akzeptanzkriterien für die Wirksamkeitsprüfung von Desinfektionsmitteln in einer aseptischen Produktionsumgebung.
Laborverfahren
Bei der Lagerung einer Gebrauchsverdünnung eines konzentrierten Desinfektionsmittels (z. B. in einem Lagertank oder einer Sprühflasche) wird von den Behörden erwartet, dass Daten vorhanden sind, die das intern festgelegte Verfallsdatum der Gebrauchsverdünnung belegen.
Gehen Sie mit äußerster Vorsicht vor, um die Ablagerung von Organismen außerhalb des vorgesehenen Expositionsbereichs des Testprodukts zu vermeiden. Bereits 0,01 µl Inokulum, das nicht mit dem Testprodukt in Kontakt kommt, können zu einem Testversagen führen.
Zur Qualifizierung einer diskreten Nasskontaktzeit muss eine Neutralisationsvalidierung durchgeführt werden. USP <1227> Validierung der mikrobiellen Wiederherstellung aus Arzneibuchartikeln, USP <61> Mikrobielle Untersuchung nicht steriler Produkte: Mikrobielle Keimzahlbestimmungen und EN 13697 Chemische Desinfektionsmittel und Antiseptika bieten mögliche Studiendesigns für die Validierung der Neutralisierung. Nachfolgend finden Sie eine Liste gängiger chemischer Neutralisationsmittel für bestimmte Wirkstoffe.
TABELLE 1. Chemische Neutralisationsmittel für gängige Desinfektionsmittelwirkstoffe
Chemical Neutralizer
Active Ingredient
Polysorbate (Tween)
Lecithin
Catalase
Sodium Thiosulfate
Phenolics, Quaternary Ammonium Compounds
Phenolics, Quaternary Ammonium Compounds
Hydrogen Peroxide
Sodium Hypochlorite
Bewerten Sie vor Beginn der Studie geeignete Nährböden und Inkubationsbedingungen für jeden Organismus.
Die Wiederherstellung durch Eintauchen der Teststreifen ist normalerweise die effizienteste Wiederherstellungsmethode. Die Standardverfahren ASTM E2197 Quantitative Prüfung von Keimträgern (Quantitative Disk Carrier) und EN 13697 Chemische Desinfektionsmittel und Antiseptika bieten mögliche Wiederherstellungsmethoden durch Eintauchen. Die Größe des Oberflächen-Teststreifen kann erhebliche Auswirkungen auf die Wiederherstellungsmethode haben. Die Eignung der Wiederherstellungsmethoden sollte mit speziellen Teststreifen für die jeweilige Oberfläche bewertet werden.
Zusätzliche Ressourcen:
USP <1072> Desinfektionsmittel und Antiseptika
PDA TR 70 Grundlagen von Reinigungs- und Desinfektionsprogrammen für aseptische Produktionsanlagen
EN 13697 Chemische Desinfektionsmittel und Antiseptika
ASTM E2197 Standardverfahren zur quantitativen Prüfung von Keimträgern
ASTM E2614 Standardleitfaden zur Bewertung von Desinfektionsmitteln für Reinräume
Vorgeschlagene Inhalte
Technischer Tipp
Häufige Irrtümer: Desinfektionsreinigung in kontrollierten Umgebungen
Im Bereich der Reinraum- und Pharmamikrobiologie haben sich einige „Mythen“ festgesetzt und werden sogar von Aufsichtsbehörden unterstützt.
Ein begründeter Prozess zur Reinigung und Desinfektion
Gesetzliche Leitlinien und Normen, wie der Anhang 1 der Europäischen Guten Herstellungspraxis (EU-GMP), wurden geschaffen, um Standards für Anforderungen zu schaffen. Dies kann zwar hilfreich sein, um bewährte Verfahren zu erreichen, es ist jedoch auch wichtig, sich vor Augen zu halten, dass Verfahren auf die jeweiligen Einrichtungen und Prozesse zugeschnitten sein müssen. In diesem Artikel befasst sich der technische Experte von STERIS, Walid El Azab, mit dem wissenschaftlichen Ansatz, um zu bestimmen, ob vor der Desinfektion ein separater Reinigungsschritt erforderlich ist.
In aseptischen Bereichen gibt es viele potenzielle Rückstandsquellen, von Menschen bis hin zu Verarbeitungsgeräten. In den meisten Fällen stellen Rückstände auf Böden und Wänden nur ein begrenztes Risiko dar, sodass optische Sauberkeit in der Regel als Ziel eines Rückstandsmanagementprogramms gilt.
Ein begründeter Prozess zur Reinigung und Desinfektion
Gesetzliche Leitlinien und Normen, wie der Anhang 1 der Europäischen Guten Herstellungspraxis (EU-GMP), wurden geschaffen, um Standards für Anforderungen zu schaffen. Dies kann zwar hilfreich sein, um bewährte Verfahren zu erreichen, es ist jedoch auch wichtig, sich vor Augen zu halten, dass Verfahren auf die jeweiligen Einrichtungen und Prozesse zugeschnitten sein müssen. In diesem Artikel befasst sich der technische Experte von STERIS, Walid El Azab, mit dem wissenschaftlichen Ansatz, um zu bestimmen, ob vor der Desinfektion ein separater Reinigungsschritt erforderlich ist.
In aseptischen Bereichen gibt es viele potenzielle Rückstandsquellen, von Menschen bis hin zu Verarbeitungsgeräten. In den meisten Fällen stellen Rückstände auf Böden und Wänden nur ein begrenztes Risiko dar, sodass optische Sauberkeit in der Regel als Ziel eines Rückstandsmanagementprogramms gilt.
